组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响

• 作者: 刘志涛 孙树春 张艳普 田树军 胡媛媛 郭军艾 陈晓勇
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: E-64 卵丘细胞 组织蛋白酶 体外发育 Real-time PCR
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1704-1711
• 分类号: S826|S814.6
• 字数: 5922字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB) mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性.采用Real-time PCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24 h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10 μmol·L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响.结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0 h、IVM 8 h和IVM 16 h)呈下降的趋势(P＜0.01).添加5和10 μmol· L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1 μmol· L-1组均显著性降低(P＜0.01),而5和10μmol·L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P＞0.05).成熟液中添加5和10 μmol·L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82％和30.95％)显著高于1 μmol· L-1组和对照组(18.23％和15.63％,P＜0.05),但5和10 μmol·L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1 μmol· L-1组和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关；组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力.