小鼠DHRS4基因原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 张廷银 闫银侠 黄东阳
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: DHRS4 基因克隆 蛋白表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 5-8
• 分类号: Q493.6|Q786
• 字数: 3353字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建小鼠pDESTM17/DHRS4重组载体,制备小鼠抗DHRS4多克隆抗体.方法:应用RT-PCR从小鼠肝组织扩增DHRS4的开放阅读框序列,测序确认后将其编码区构建到载体pDONRTM201上,再通过LR置换反应再将其置换到载体pDESTTM17上,测序后转化到E.coli BL21-AI工程菌中,并经阿拉伯糖诱导表达出抗DHRS4融合蛋白.以小鼠融合蛋白作为免疫原免疫大白兔,制备小鼠抗DHRS4多克隆抗体.结果:成功构建小鼠DHRS4重组载体；转化重组质粒的E.coli BL21-AI经阿拉伯糖诱导4h后高效表达DHRS4融合蛋白；Western bolt实验结果显示制备的多克隆抗体可特异性检测小鼠肝组织DHRS4相应蛋白的表达.结论:成功构建小鼠pDESTM17/DHRS4原核表达载体和获得小鼠抗DHRS4多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄东阳	汕头大学医学院细胞生物学教研室	51	423	10.0	19.0
2	闫银侠	汕头大学医学院细胞生物学教研室	2	1	1.0	1.0
3	张廷银	汕头大学医学院细胞生物学教研室	1	1	1.0	1.0