RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 倪丽 宋于刚
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠肿瘤 1-磷脂酰肌醇-3激酶,p110β亚单位 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 22-27
• 分类号: R735.34
• 字数: 5795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.01.005

摘要

目的:探讨RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因(编码PI3Kp110 β蛋白)的表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计3条针对PIK3CB基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别瞬时转染结肠癌HCTll6细胞.用Real time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的PIK3CB-siRNA序列,然后进行CCK一8细胞增殖实验,并采用.IC-1染色法检测线粒体膜电位(△Ψm)的变化.结果:经转染PIK3CB-siRNA-179序列的HCTll6细胞中P13Kp110 B mRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验.CCK-8细胞增殖实验显示,瞬时转染24、48及72 h后,PIK3CB-siRNA-179组细胞的相对存活率较阴性对照组细胞明显降低,其中以24 h及48 h降低最为明显(P＜0.05).JC-1染色结果显示,瞬时转染48 h后PIK3CB-siRNA-179组细胞的线粒体膜电位较阴性对照组细胞明显降低.结论:抑制P13Kp110 B蛋白表达可降低结肠癌HCT116细胞的增殖速度,诱导细胞的凋亡,推测PIK3CB基因可能成为结肠癌基因治疗的一个新靶点.