艰难梭菌分离株快速鉴定和毒素检测的多重PCR方法的建立

• 作者: 卢金星 杨辉 王靖 程颖 贾红兵 鄢盛恺
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 艰难梭菌 聚合酶链反应 厌氧培养 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫检测
• 页码范围: 755-759
• 分类号: R3
• 字数: 4479字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2011.08.020

摘要

目的 建立可同时进行艰难梭菌分离株菌种鉴定和毒素检测的多重PCR方法。方法 用于多重PCR中的3对引物分别为艰难梭菌的种特异性的磷酸内糖异构酶(triose phosphate isomerase，tpi)基因、毒素A基因部分序列、毒素B基因部分序列。艰难梭菌ATCC 9689等21株标准菌株和47株临床分离艰难梭菌分别被应用于多重PCR最低检出限、特异性评估试验和验证试验。同时，应用ELISA对47株分离株进行毒素A/B检测。结果 该多重PCR方法可检测到最低DNA浓度为0.5 pg/μ l，特异性为100％。47株艰难梭菌分离株中tpi基因均为阳性，其中毒素基因A(+)/B(+)为37株，毒素基因A（-）/B（-）为10株，未检出毒素基因A（-）/B(+)菌株。47株毒素A/B检测结果为20株阳性、27株阴性。毒素A/B阳性的20株菌均为多重PCR检测毒素基因A(+)/B(+)。结论 成功建立用于艰难梭菌的菌种鉴定和毒素分析结合为一体的多重PCR方法，对临床诊断艰难梭菌感染有着重要应用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王靖	中日友好医院检验科	20	74	5.0	7.0
2	卢金星	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	25	140	7.0	10.0
3	鄢盛恺	中日友好医院检验科	20	56	4.0	5.0
4	程颖	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	15	83	6.0	8.0
5	杨辉	中日友好医院检验科	10	25	3.0	4.0