温和过甲酸氧化辅助酶解结合液质联用技术鉴定大鼠大脑皮层质膜蛋白质

• 作者: 宋琴 曹锐 梁宋平 王贤纯 陈平
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 温和过甲酸氧化 串联质谱 膜蛋白 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 218-222,240
• 页数: 6页
• 分类号: Q955
• 字数: 4201字
• 语种: 中文

摘要

由于膜蛋白质尤其是内在膜蛋白的强疏水性,分析和鉴定质膜蛋白质仍然是以质谱为基础的蛋白质组学的方法中的一个难点.过甲酸氧化是一种应用广泛的打开二硫键的方法,温和的过甲酸试剂能完全的将半胱氨酸转化为半胱磺酸,将甲硫氨酸转化为甲硫氨酸砜,从而使目的蛋白更易溶于水介质.采用蔗糖密度梯度离心法纯化得到大鼠大脑皮层质膜,提取的质膜蛋白质经温和过甲酸氧化处理后经胰酶酶解消化得到肽段,利用LC-MS/MS对所得肽段进行质谱分析,采集的原始数据用Mascot软件进行库搜寻鉴定.此方法是研究质膜蛋白质的新方法,温和过甲酸氧化显示出很好的氧化效果却避免其它不利于鉴定的副反应.从大鼠大脑皮层膜提取物共鉴定出220种蛋白质,其中73种为整合膜蛋白,证明对质膜蛋白质直接进行温和过甲酸氧化然后酶解的方法辅助酶解可以有效的鉴定质膜蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁宋平	湖南师范大学生命科学学院	131	1082	16.0	26.0
2	王贤纯	湖南师范大学生命科学学院	44	346	11.0	17.0
3	陈平	湖南师范大学生命科学学院	34	411	12.0	20.0
4	曹锐	湖南师范大学生命科学学院	7	23	3.0	4.0
5	宋琴	湖南师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0