烟草靶斑病菌基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

• 作者: 伏颖 吴元华 穆凌霄 赵秀香
• 来源期刊: 烟草科技
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草靶斑病菌 DNA提取 RAPD 反应体系
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 病虫害防治
• 页码范围: 71-75,78
• 分类号: S432.41
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-0861.2011.11.018

摘要

采用改良的CTAB法,对16个烟草靶斑病菌菌株进行基因组DNA的提取,所得的DNA样品的OD26o/OD280值在1.76～1.89之间,电泳主带清晰,无弥散、拖尾现象,DNA质量较高.通过单因素和正交设计结合的方法对影响RAPD-PCR反应的主要因子Mg2+,dNTP,引物的浓度和模板DNA,Taq酶的用量进行了优化,建立了适宜于病菌的RAPD分子标记的最佳反应体系.优化的反应体系为:模板DNA 10 ng,Mg2+浓度3.25 mmol/L,dNTP浓度0.175 mmol/L,Taq酶1.4 U,引物浓度0.5 μmol/L,反应体系总体积为25 μL.通过该反应体系可以获得清晰、稳定、特异性的分子标记谱带,扩增结果较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴元华	沈阳农业大学植物保护学院	159	2074	24.0	38.0
2	赵秀香	沈阳农业大学植物保护学院	85	876	18.0	25.0
3	伏颖	沈阳农业大学植物保护学院	10	52	5.0	6.0
4	穆凌霄	沈阳农业大学植物保护学院	6	44	5.0	6.0