类志贺邻单胞菌实时荧光TaqMan PCR 快速检测体系的建立

• 作者: 叶长芸 孟双 李爱华 王艳 白雪梅 纪少博
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 类志贺邻单胞菌 实时荧光TaqMan PCR 23S rRNA
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 906-910
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文

摘要

目的 建立针对类志贺邻单胞菌的高灵敏、高特异的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系.方法 根据类志贺邻单胞菌23S rRNA基因的一段特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度；用30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性.结果 实时荧光TaqMan PCR快速检测体系对类志贺邻单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系；对类志贺邻单胞菌基因组的检测灵敏度为3 × 10-2pg/反应体系；该检测体系在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现特异性扩增,整个反应在2h内完成.结论 本研究建立的实时荧光TaqMan PCR 检测体系可作为类志贺邻单胞菌灵敏、特异、快速的检测方法.