脐带间充质干细胞的分离培养及诱导分化为多巴胺能样神经元

• 作者: 刘晓平 卢国辉 张世忠 李振勇 李明
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带 间充质干细胞 多巴胺能神经元
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 241-245
• 分类号: R329.2
• 字数: 3646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2011.03.007

摘要

目的 探索脐带间充质于细胞(MSCs)的分离培养及将其诱导分化为多巴胺能神经元的方法.方法 分离脐带间充质组织,Ⅳ型胶原酶消化分离脐带MSCs,原代培养于含10%FBS的DMEM/F12培养基中,观察细胞形态并应用流式细胞仪检测细胞表面标志物和细胞周期,CCK8法绘制细胞生长曲线;采用二步法诱导分化P3代脐带MSCs,培养3、6、9 d后终止诱导,应用免疫荧光染色和Wcstern blotting检测分化后细胞酪氨酸羟化酶(TH)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达.结果 分离培养的脐带MSCs形态呈相对均一的成纤维样细胞,平行排列或旋涡状生长.P3代细胞CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性,而CD34、CD45、CD19、CD31、HLA-DR表达阴性.对数生长期细胞倍增时间为48 h,处于G0～G1期细胞占91.13%;诱导分化后细胞多数为两级,形态与神经元相似,免疫荧光染色检测结果显示诱导9 d时细胞NSE、TH染色阳性率分别为19.5%和8.9%,Weston blotting检测结果显示诱导6 d时细胞NSE表达明显,TH仅有弱表达,诱导9 d时TH、NSE均表达明显.结论 脐带间充质组织中能分离出MSCs,且能分化成多巴胺能神经元.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张世忠	南方医科大学珠江医院神经外科	33	169	7.0	11.0