用腺病毒载体包装不同分化程度平滑肌细胞特异性启动子的策略分离鉴定人前列腺间质细胞亚群

• 作者: 师莹 张琚 彭雁飞 杨小丽 王亮 石建党
• 来源期刊: 南开大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 前列腺间质细胞 SMC启动子 腺病毒
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 分类号: Q71
• 语种: 中文

摘要

在良性前列腺增生组织间质中,平滑肌细胞收缩表型和合成表型的数量和比例的改变与病理过程密切相关.分离鉴定具有不同平滑肌表型的细胞亚群对研究它们基因表达的差异以及自分泌和旁分泌作用至关重要.PCR扩增得到不同分化程度的人平滑肌细胞特异性基因SM22和MYH11的启动子片段,用荧光素酶活性测定启动子活性.构建基于启动子特异性的绿色荧光蛋白表达质粒；用腺病毒包装系统得到带有平滑肌细胞特异性启动子调控的绿色荧光报道子的病毒颗粒.通过免疫荧光染色,鉴定该启动子序列的特异性.结果表明,用腺病毒包装的带有绿色荧光蛋白的平滑肌细胞标记蛋白SM22和MYH11的启动子具有活性和特异性.腺病毒载体在前列腺正常间质细胞系NAF中总感染效率约为90％,其中SM22阳性表达的细胞约为10％,MYH11阳性表达的细胞约为2％.