家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的克隆及序列分析与融合表达

• 作者: 代君君 吴传华 汤强 王储炎 章玉萍 苗雪霞 范涛 蒋剑豪 赵云坡
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 G蛋白α亚基 基因克隆 序列特征 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 312-319
• 分类号: S881.2|Q78
• 字数: 4537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.02.021

摘要

异三聚体G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到细胞内的重要分子,参与生物体内广泛的信号转导途径.采用生物信息学方法和RT-PCR、RACE技术克隆了家蚕G蛋白α亚基基因BmGα12的全长cDNA序列,该序列全长1374bp,开放阅读框(ORF)1128bp,编码375个氨基酸.将构建的表达载体pET-41b(+)-Ga12转化E.coli BL21宿主菌进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测显示,BmGα12可在E.coli BL21中高效表达,GST-BmGα12融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量约71kD.系统进化分析显示BmGa12与大鼠和人Gα12/Gα13的亲缘关系较近,初步推测BmGα12介导的信号传导同样在细胞生长、胚胎发育中起重要作用.