腺病毒载体介导PDX1在人脐带间充质干细胞中的表达

• 作者: 万赤丹 吴汉青 吴河水 毛明刚 王博 王春友
• 来源期刊: 中华内分泌外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰十二指肠同源框-1基因 间充质干细胞 穿梭载体 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 225-229
• 分类号: R587.1
• 字数: 4517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-6090.2011.04.004

摘要

目的 构建含胰十二指肠同源框-1基因（pancreatic and duodenal homeobox factor 1，PDX1）的重组腺病毒载体，并检测其在人脐带间充质干细胞(human umblic cord msenchymal stem cells，HUCMSCs)的表达情况。方法 用BgⅢ/XhoI酶从pUC57-PDX1酶切PDX1，连接到pShuttle-GFP-CMV重组穿梭载体，得到pShuttle-GFP-CMV-PDX1重组穿梭质粒，再将pShuttle-GFP-CMV-PDX1转移到pAdxsi载体上，得到pAdxsi-GFP-PDX1病毒质粒，利用脂质体介导重组腺病毒载体转染293细胞，包装出完整的腺病毒。用重组腺病毒感染HUCMSCs 24 h 后，经荧光显微镜、RT-PCR、免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等检测PDXI基因及蛋白的表达。结果通过测序、酶切等鉴定PDXI基因正确插入穿梭质粒中，并与病毒骨架质粒重组，重组腺病毒可高效转染HUCMSCs，RT-PCR检测到PDXI mRNA在HUCMSCs中表达，经免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等证实转染PDXI在HUCMSCs胞核中表达。结论成功构建了PDX1腺病毒载体，并在HUCMSCs中有效表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春友	华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所	244	1645	18.0	28.0
2	吴河水	华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所	114	642	11.0	22.0
3	万赤丹	华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所	41	180	8.0	11.0
4	王博	华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所	36	235	8.0	14.0
5	毛明刚	解放军第457医院放射科	6	15	3.0	3.0
6	吴汉青	华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所	17	49	5.0	6.0