猪肌内前体脂肪细胞的体外培养

• 作者: 任阳 单体中 张艳芳 朱琳娜 汪以真
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肌内前体脂肪细胞 细胞培养 猪
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 116-121
• 分类号: S8
• 字数: 5042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.01.017

摘要

本研究建立了猪肌内前体脂肪细胞的体外培养模型,以期为更深入研究猪肌内脂肪代谢提供新的实验方法.实验采集出生5 d仔猪的背最长肌组织,Ⅱ型胶原酶消化2 h后400目筛网过滤,然后1 500 r/min离心,沉淀用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基(完全培养基)重悬后差速贴壁2 h,弃去原有培养基,加入新的含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基(完全培养基)进行培养.细胞经传代且完全融合48 h后,在完全培养基中添加0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),1 μmol/L地塞米松(DEX),10 mg/L胰岛素(INS)进行诱导培养48 h,再换以含10 mg/L胰岛素的完全培养基培养48 h,最后换完全培养基继续培养,直至90%的细胞出现脂滴.培养结果:细胞贴壁生长,呈短梭状或棱形,经诱导培养后细胞充脂率高.经形态学观察、生长曲线及油红O脂肪染色法鉴定,证明是肌内前体脂肪细胞.普通PCR及实时荧光定量PCR均检测到了脂联素基因的表达.本研究通过差速贴壁法成功培养了猪肌内前体脂肪细胞,并通过诱导培养重现了其分化、成熟的全过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单体中	浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室	25	338	12.0	18.0
2	汪以真	浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室	163	2258	25.0	39.0
3	张艳芳	浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室	2	15	1.0	2.0
4	任阳	浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室	2	14	1.0	2.0
5	朱琳娜	浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室	2	14	1.0	2.0