PES1慢病毒表达载体的构建及其对乳腺癌ZR75-30细胞生长的影响

• 作者: 叶棋浓 张浩 徐小洁 曹佳 朱建华 杨智洪 程龙 蒋凯 韩永健
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: PES1 慢病毒载体 乳腺癌 细胞生长
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 196-198,219
• 分类号: Q78
• 字数: 2484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.02.011

摘要

目的:利用慢病毒载体表达PES1基因,研究其对乳腺癌ZR75-30细胞生长的影响.方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增PES1基因,克隆到pCDH载体,构建成pCDH-PES1,将其与包装载体共转293T细胞,包装成Lenti-PES1慢病毒载体并测定病毒滴度,感染乳腺癌ZR75-30细胞,Western印迹鉴定病毒载体介导的PES1蛋白的表达,并用生长曲线实验研究过量表达PES1对ZR75-30细胞生长的影响.结果:酶切和Western印迹表明得到pCDH-PES1阳性克隆,成功包装成Lenti-PES1慢病毒载体,滴度为2.5x107 pfu/mL;将此慢病毒载体感染ZR75-30细胞,Western印迹显示慢病毒载体成功表达PES1,生长曲线实验表明过量表达PES1可促进ZR75-30细胞的生长.结论:构建了PES1的慢病毒表达载体Lenti-PES1,在ZR75-30细胞中过量表达PES1可促进细胞的生长.