分子尺寸排阻高效液相色谱法检测戊型肝炎类病毒颗粒

• 作者: 周思杭 李天成 李静 王宁 王青波
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分子尺寸排阻 高效液相色谱 戊型肝炎病毒 类病毒颗粒
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1220-1223
• 分类号: R373.2|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 采用分子尺寸排阻高效液相色谱(Size-exclusion HPLC,SE-HPLC)法检测戊型肝炎类病毒颗粒(Hepatitis E virus-like particle,HE VLP).方法 分别采用超速离心法和Sephacryl S-200HR凝胶层析法制备HE VLP,对两种方法 制备的HE VLP进行SDS-PAGE、Western blot、电镜观察、动态光散射及SE-HPLC分析,建立SE-HPLC定性、定量分析HE VLP的方法,并利用该方法 对不同时间点培养上清HE VLP进行定量分析.结果 SDS-PAGE及Western blot分析显示,两种方法 制备的HE VLP均可见相对分子质量约为50 000的目的蛋白条带,浓度和纯度基本一致,且具有相同的反应原性；电镜观察可见,超速离心法制备的HE VLP为直径约30 nm的均匀空心颗粒,层析纯化的HE VLP则为大量不规则的团块及少量空心颗粒；动态光散射分析显示,超速离心法制备的HE VLP只有1个峰,颗粒直径为27.2 nm,纯度大于98％,层析纯化的HE VLP颗粒半径2 ～120 nm不等；SE-HPLC分析显示,HE VLP含量在1～ 40 μg范围内与峰面积呈线性相关,且精密性良好；利用该法能够对病毒细胞培养液中的HE VLP进行实时定量.结论 SE-HPLC可以对HE VLP进行定性、定量分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁	北京生物制品研究所第四研究室	5	16	3.0	4.0
2	李静	北京生物制品研究所第四研究室	5	14	2.0	3.0
3	周思杭	北京生物制品研究所第四研究室	2	10	2.0	2.0
4	王青波	北京生物制品研究所第四研究室	1	5	1.0	1.0