东方田鼠微卫星标记的富集筛选与初步应用

• 作者: 倪丽菊 柏熊 胡建华 谢建云 陶凌云 高诚
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 农学
• 关键词: 东方田鼠 磁珠富集 微卫星标记 遗传多样性
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 989-995
• 分类号: S443|Q953
• 字数: 5826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.00989

摘要

根据生物素与链霉亲和素的亲和原理,利用磁珠富集法筛选东方田鼠(Microtus fortis)微卫星分子标记.链霉亲和素磁珠捕获生物素标记的微卫星探针,然后与连有接头的单链限制性酶切片段复性结合,获得含有微卫星的单链片段,PCR扩增形成双链,连接T载体并转化感受态细胞,得到东方田鼠微卫星富集文库.随机挑选70个阳性克隆,经测序分析,获得微卫星序列92个.设计合成27对微卫星引物并成功筛选出21对可用引物,取其中10对引物,荧光标记后对3个人工驯养及野生东方田鼠种群进行遗传多样性分析.结果显示,文章所构建的东方田鼠微卫星文库的阳性克隆率较高,初步筛选的10个微卫星标记均为具有高度多态性的微卫星标记.在3个东方田鼠种群中,野生湖南种群的观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)均最高,人工驯养的湖南种群次之,人工驯养的宁夏种群最低.