葡萄白藜芦醇合酶基因cDNA克隆及原核表达

• 作者: 付洪冰 崔崇士 崔莹
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 白藜芦醇合酶 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 422-427
• 分类号: S663.1
• 字数: 4368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2011.04.007

摘要

从贝达葡萄中提取总RNA,采用RT-PCR方法,克隆到了白藜芦醇合酶(resveratrol synthase,RS)基因的全长cDNA.将其与圆叶葡萄(Vitis rotundifolia)、华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)、河南毛葡萄(Vitis ficifolia)、河岸葡萄(Vitis vulpine)、酿酒葡萄(Vitis virufera)、羊蹄甲(Bauhinia)、花生(Arachis hvpogaea)、虎杖(Polygonum cuspiaatum)、大黄(Rheum officinale)进行氨基酸同源性比对,结果表明:分离的RS基因与其他葡萄的RS基因编码的氨基酸同源性达到97％以上,与其他属的RS基因编码的氨基酸同源性达到64％以上.生物信息学分析表明,该蛋白分子量为43kD,等电点pI=6.2,包含392个氨基酸残基.将RS的全长cDNA插入到表达载体pET28a中构建重组表达质粒pET28a-RS,转化大肠杆菌BL21,SDS-PAGE电泳检测结果表明,以30C、0.5mmol·L--1PTG诱导4h时该基因表达效果最好,诱导产物为1个约43kD的蛋白,为进一步纯化和鉴定目的蛋白提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔崇士	东北农业大学园艺系	119	1485	21.0	30.0
2	付洪冰		16	33	4.0	4.0
3	崔莹		21	121	6.0	10.0