颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究

• 作者: 何升东 刘敬 周新 左海斌 彭代智 郑必祥
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外基质 颗粒状脱细胞真皮基质 粒径分布 傅里叶变换红外光谱仪
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 4-8
• 分类号: R322.991|R329.24|R329.27
• 语种: 中文

摘要

目的 研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能.方法 收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和DNA残留情况.将片状ADM切割成不同规格的PADM,并结合大体观察、组织学分析、电镜技术、激光粒度分析仪和傅里叶变换红外光谱仪检测其外观轮廓、形态学、粒径分布和胶原分子结构.并将其复合人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外培养24 h,观察PADM与HUVEC的黏附情况.结果脱细胞方法有效降低了ADM的DNA含量[(1.51±0.37) μg/mg vs (0.30±0.09) μg/mg].制备的PADM为白色颗粒,外形近似于长方体或立方体,显微镜下HE染色观察显示颗粒内部胶原纤维束结构疏松.扫描电镜显示颗粒断面结构疏松,透射电镜显示胶原原纤维周期性横纹结构和均匀分布的胶原原纤维间隙.激光粒度分析仪检测显示其粒度分布集中,例如,规格为0.2 mm 的PADM,其80%(d0.1 ～ d0.9)的粒径分布于233～487 μm.FTIR结果显示,PADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1处出现的特征吸收峰,表明其保留了胶原分子的α-helix、β-sheet和β-turn二级结构,且体外HUVEC较易黏附于PADM.结论室温条件下,切割法制备的新型PADM形态规则,粒径分布集中,胶原纤维束形态和胶原分子的二级结构保存良好.