利用正交设计优化甘蔗SRAP-PCR反应体系

• 作者: 刘家勇 吴才文 吴转娣 昝逢刚 赵俊 赵培方
• 来源期刊: 中国糖料
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蔗 SRAP-PCR 正交设计 优化
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 6-8
• 分类号: S566.101
• 字数: 1879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-2624.2011.03.002

摘要

利用正交设计L16(45)对甘蔗SRAP-PCR反应体系的五大因素(Mg2+、dNYPs、引物、模板DNA、Taq酶)在4个水平上进行优化,得到如下结论:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次是:Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA;通过对各因素进行筛选,建立甘蔗SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为:dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.1μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L、Taq酶0.25U和模板DNA 60 ng.