人DC-SIGN真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达

• 作者: 刘朝奇 吕佰瑞 姚佳红 李斌
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: DC-SIGN基因 真核表达 免疫荧光 Western blotting
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 32-34
• 分类号: Q782
• 字数: 2510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.01.011

摘要

目的:构建人DC-SIGN基因真核表达质粒,观察其在人肺腺癌细胞A549中的表达.为进一步研究DC-SIGN的作用奠定实验基础.方法:用PCR的方法扩增编码DC-SIGN的基因序列,将其克隆到真核表达载体pCDNA中,酶切及测序鉴定重组质粒.将构建的重组质粒转染到A549细胞中,用Western Blotting和免疫荧光等方法检测DC-SIGN基因的表达.结果: 从人cDNA文库中得到1 215bp的DC-SIGN序列后,重组到pCDNA载体中,经酶切及测序鉴定,成功构建pCDNA-DC-SIGN重组质粒.重组质粒转染A549细胞,经Western blotting检测,发现在约55kDa处有特异条带,与理论大小相符.应用免疫荧光技术检测DC-SIGN可在A549细胞内的表达.荧光显示Myf5蛋白定位在细胞浆中.建立表达DC-SIGN的细胞株.结论:成功构建了人DC-SIGN的真核表达载体,并建立了人DC-SIGN的真核表达细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘朝奇	三峡大学分子生物学研究所	171	552	10.0	15.0
2	姚佳红	三峡大学分子生物学研究所	14	109	7.0	10.0
3	李斌	三峡大学分子生物学研究所	20	89	4.0	9.0
4	吕佰瑞	三峡大学分子生物学研究所	14	30	3.0	5.0