小鼠ZBTB9基因的克隆、亚细胞定位及原核表达

• 作者: 刘庆梅 周斌 徐凤芹 成红霞 王尉平 王明华 许维岸 车建花 黄中开
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 锌指蛋白 ZBTB9基因 基因克隆 亚细胞定位 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 15-18
• 分类号: Q786
• 字数: 2820字
• 语种: 中文

摘要

应用RT-PCR扩增技术从小鼠肺组织中成功克隆锌指蛋白ZBTB9基因；该基因含有1 380 bp的开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸.为研究其生物学功能,构建pEGFP-C1/ZBTB9融合载体转染细胞,亚细胞定位显示ZBTB9定位于细胞核且呈斑点状分布.构建原核表达载体pGEX-4T-1/ZBTB9,转入大肠杆菌BL21(DE3 Lysis)中,IPTG诱导融合蛋白表达.重组蛋白经SDS-PAGE鉴定后进行纯化.结果表明:成功地纯化了ZBTB9的融合蛋白.ZBTB9基因的成功克隆及表达,为进一步深入研究ZBTB9的生物学功能奠定基础.