大鼠丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2的表达、纯化及抗体制备

• 作者: 于芳 林宇翔 绳纪坡 胡宝成 马祖兴 高宁
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2 表达 纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 1-5
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4679字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.01.001

摘要

目的:原核表达、纯化大鼠丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2(SERPINB2),并制备其多克隆抗体.方法:设计扩增大鼠Serpinb2全长基因的特异引物,通过PCR扩增出该基因片段,测序正确后插入含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果:原核表达了大鼠Serpinb2全长基因,纯化了SERPINB2蛋白,并获得了抗SERPINB2的多克隆抗体,抗体效价达到1:25 600,Western印迹结果显示该抗体能特异识别原核及真核细胞表达的SERPINB2.结论:SERPINB2能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究SERPINB2的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林宇翔	军事医学科学院生物工程研究所	5	3	1.0	1.0
5	绳纪坡	军事医学科学院生物工程研究所	18	50	4.0	6.0
6	于芳	军事医学科学院生物工程研究所	27	68	5.0	7.0
7	胡宝成	军事医学科学院生物工程研究所	35	154	5.0	11.0
8	高宁	军事医学科学院生物工程研究所	25	56	3.0	6.0
9	马祖兴	军事医学科学院生物工程研究所	3	2	1.0	1.0