镉对HepG2细胞DNA损伤作用以及对gadd基因表达的影响

• 作者: 张振杰 张荣 李尧 樊龙刚 牛玉杰 赵娟 郭会彩 陈庆
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 镉 DNA损伤 基因
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 409-412
• 分类号: R593.22
• 字数: 3448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2011.06.003

摘要

目的 探讨氯化镉对HepG2细胞DNA损伤作用以及对gadd153和gadd45β启动子和mRNA表达的影响.方法 应用彗星试验检测氯化镉对HepG2细胞的DNA损伤作用;分别构建含有gadd153和gadd45β启动子和荧光素酶报告基因的载体pGADD153-Luc和pG45-Luc,荧光素酶活性检测反映gadd153和gadd45β启动子的活性,生物发光检测荧光素酶活性;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测gadd153和gadd45β基因mRNA的表达.结果 彗星试验结果显示,在100、300 μmol/L氯化镉处理细胞24 h后,Olive尾矩(分别为0.78±0.06、1.10±0.12)明显高于对照组(0.53±0.08),差异有统计学意义(P<0.05),并有良好的剂量-效应关系(r=0.9761,P<0.05);报告基因分析显示,1、5、10 μmol/L氯化镉处理组gadd153启动子表达[分别为(9.45±1.26)、(11.76±1.12)、(21.14±1.47)RIU/μg Pro]均明显高于对照组[(7.02±0.82)RIU/μg Pro]差异均有统计学意义(P<0.05),并有良好的剂量-效应关系(r=0.8755,P<0.05);5、10μmol/L氯化镉处理组gadd45β启动子表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),并有良好的剂量-效应关系(r=0.8856,P<0.05);RT-PCR结果显示,1、5、10μmol/L氯化镉处理组gadd153 mRNA表达均明显高于对照组,5、10 μmol/L氯化镉处理组gadd45β mRNA表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 氯化镉可诱导HepG2细胞DNA损伤,较低剂量氯化镉即使未引起明显的DNA损伤,亦可促进HepG2细胞gadd153和gadd45β启动子和mRNA的表达.