RNAi真核表达载体上报告基因的构建及其在人结肠癌HCT-8细胞中的表达

• 作者: 徐静 李明辉 蒋茜
• 来源期刊: 吉林医学
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 真核表达 HCT-8细胞
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 4519-4522
• 分类号: R373.21
• 字数: 2551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0412.2011.22.002

摘要

目的:构建携带绿色荧光蛋白报告基因的pSilencer3.1-H1真核表达载体,并转染真核细胞稳定表达,为进一步应用于RNAi相关研究奠定了基础.方法:应用PCR方法从pEGFP-C1标准质粒中获得GFP基因片段,在克隆载体中鉴定、测序;用DNA重组技术将片段定向插入RNAi常用载体pSilencer3.1-H1质粒中,构建pSilencer3.1-H1/GFP重组表达载体,经PCR及酶切鉴定后,通过脂质体介导转染HCT-8真核细胞;荧光显微镜观察GFP在细胞内的表达.结果:真核表达载体pSilencer3.1-H1中正确插入了GFP基因片段,并在人结肠癌HCT-8真核细胞中稳定的表达.结论:成功构建了pSilencer3.1-H1/GFP真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明辉		7	26	3.0	5.0
2	徐静		49	240	10.0	12.0
3	蒋茜		29	119	6.0	9.0