小鼠精胺氧化酶基因启动子结构和功能研究

• 作者: 汤桂成 王艳林 韩钰
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 多胺 精胺氧化酶 启动子 转录调控
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 14-17
• 分类号: Q751
• 字数: 2755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.01.005

摘要

目的:克隆和鉴定小鼠精胺氧化酶(mSMO)启动子DNA序列.方法:用Trizol试剂法从小鼠成纤维细胞中提取总RNA,应用5'-RACE法获得mSMO的转录起始位点;巢式PCR方法克隆含有mSMO启动子的DNA序列,并由此构建5'端系列截短的mSMO启动子荧光素酶报告质粒;将报告质粒瞬时转染Cos7细胞后,用荧光素酶分析法测定启动子活性.结果:确定mSMO基因至少有6个转录起始位点(+1,+4,+27,+31,+51,和+63),且均定位于外显子1中.克隆获得mSMO基因转录起始位点上游大约2.1kb的DNA片断,以此片段为基础构建了11个5'端系列截短的启动子报告质粒.报告基因分析证实,该上游DNA片段具有启动子活性,截短至-615和-176bp时,获得2个启动子活性峰值,截短至-373bp时启动子活性最低.结论:mSMO基因含有多个转录起始位点,其上游-176～+124bp为mSMO核心启动子区,-615～-176bp区为重要的转录调控区.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩钰	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	71	175	7.0	9.0
2	王艳林	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	137	424	11.0	16.0
3	汤桂成	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	41	154	7.0	10.0