人β神经生长因子基因稀有密码子及mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响

• 作者: 丁红梅 刘农乐 孙卫国 李少华 欧晓敏 王芳 赵强 邵宁生
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人β神经生长因子 稀有密码子 mRNA二级结构 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 789-792
• 分类号: Q78|Q75
• 字数: 2964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.06.009

摘要

目的:研究人β神经生长因子(3-NGF)基因中稀有密码子及其mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达量的影响.方法:根据对人β-ngf中稀有密码子及其mRNA二级结构的研究,同义突变人β-ngf基因,通过PCR得到人β-ngf的5 ′端同义突变基因rh-β-ngfp2和全同义突变基因rh-β-ngfinu,将这2个序列克隆入载体pET3a中,得到重组质粒pET3a-ngfp32和pET3a-ngfmu,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导表达,收集菌体,SDS -PAGE检测其表达量的改变.结果:构建的pET3a-ngfp32和pET3a-ngfnu表达载体酶切和测序结果正确,SDS-PAGE结果显示,与在重组菌pET3a-NGF总蛋白中的表达量相比,目的蛋白rh-3-NGF在重组菌pET3a-NGFP32和pET3a-NGFmu中的表达量均明显增高,并且在重组菌pET3a-NGFmu中的表达量高于重组菌pET3a-NGFP32.结论:目的蛋白rh-3-NGF在重组菌pET3a-NGFP32和pET3a-NGFmu中表达量的增高,说明人β-ngf基因中稀有密码子和mRNA的二级结构对其在大肠杆菌中的表达有较为明显的影响,结果为构建rh-3-NGF的大肠杆菌工程菌株奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王芳	军事医学科学院基础医学研究所	27	162	5.0	12.0
2	李少华	军事医学科学院基础医学研究所	20	90	4.0	9.0
3	邵宁生	军事医学科学院基础医学研究所	79	523	11.0	20.0
4	赵强	军事医学科学院基础医学研究所	17	195	5.0	13.0
5	丁红梅	军事医学科学院基础医学研究所	22	48	4.0	5.0
6	刘农乐	军事医学科学院基础医学研究所	16	129	4.0	11.0
7	欧晓敏	军事医学科学院基础医学研究所	1	2	1.0	1.0
8	孙卫国	解放军309医院结核病研究室	1	2	1.0	1.0