麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因的克隆与原核表达

• 作者: 喻川 王勇 苟春宝 陈放 魏炜 黄静
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 麻疯树 肌醇-1-磷酸合成酶 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 1397-1402
• 分类号: Q94
• 字数: 4564字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2011.06.031

摘要

通过RACE技术,克隆了麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因(JcMIPS),其开放读码框为1530 bp,编码510个氨基酸.序列分析表明,JcMIPS与多种植物MIPS基因的氨基酸序列具有较高相似性,达87.08％～91.180％,且含有MIPS基因的四个保守域.在此基础上构建了原核表达载体,在1 mmol/L IPTG,18℃下诱导表达5h,获得了可溶性的目的蛋白.亲和层析纯化目的蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcMIPS原核表达成功.