结核分枝杆菌蛋白TB9.7间接ELISA方法的建立

• 作者: 元振杰 曹旭东 王燕 陈创夫
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 结核分枝杆菌 TB9.7 原核表达载体 ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 65-70
• 分类号: S811.5
• 字数: 5940字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2011.03.016

摘要

为获得新的鉴别诊断结核杆菌感染的候选抗原,根据Gene Bank中登录的结核杆菌H37 Rv的TB 9.7基因序列设计1对引物,以结核杆菌H37 Rv基因组DNA为模板,PCR扩增得到TB 9.7基因DNA片段.将该扩增片段克隆于PMD18-T载体中,得到载体PMD18-T-TB9.7.分别将pET32a质粒和PMD18-T-TB 9.7质粒用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,并将纯化的TB 9.7基因亚克隆至pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-TB 9.7.将其转化E.coliBL21 IPTG诱导后,经SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,可见约30ku的外源蛋白带.表明TB9.7基因在大肠杆菌中得到了表达.用Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的TB9.7融合蛋白,建立间接ELISA诊断方法,检测了30份结核病人的痰检阳性血清,120份健康人的血清,敏感性为56.6％,特异性为97％,与痰检结果的符合率为84％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈创夫	石河子大学动物科技学院	192	732	14.0	17.0
2	曹旭东	石河子大学医学院	25	84	6.0	8.0
3	王燕	石河子大学动物科技学院	35	109	6.0	9.0
4	元振杰	石河子大学动物科技学院	3	13	2.0	3.0