应用酵母双杂交筛选系统从药用植物中发现Aβ聚集抑制剂

• 作者: 张英涛 杨雁芳 王丽威
• 来源期刊: 中国药学（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔兹海默病 β淀粉样肽 酵母双杂交 抑制剂 药物筛选
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 510-517
• 页数: 8页
• 分类号: R96
• 语种: 英文
• DOI: 10.5246/jcps.2011.05.065

摘要

研究证据表明,β淀粉样肽即Aβ的自我聚集是阿尔兹海默病(AD)重要的发病因素.因此,Aβ聚集抑制剂被认为是潜在的AD治疗候选药物.在本研究中,我们建立了一个基于酵母双杂交技术的Aβ聚集抑制剂筛选系统.通过采用拼接PCR技术(assembly PCR),克隆了人源A342的cDNA并将其插入到分别含有酵母转录因子GAL4转录激活区(GAL4AD)与DNA结合区(GAL4BD)的两个表达载体中.通过以上两个载体的共转化实现了两个融合蛋白GAL4AD-Aβ42与GAL4BD-Aβ42在AH109酵母菌株中的共表达.由于Aβ42片段在酵母中的自我相互作用使GAL4转录因子的活性在酵母中得到重建,从而激活了依赖于GAL4活性的四个报告基因HIS3,ADE2,lacZ与MELI的转录与表达.以上报告基因的正常表达使具有多种营养缺陷表型的AH109酵母获得了在缺乏组氨酸与腺嘌呤的合成选择培养基上正常生长的能力.通过采用生长抑制作为筛选标记,应用本系统对红景天属植物的Aβ聚集抑制活性进行了分析,进而发现本属植物很可能成为Aβ聚集抑制剂发现的重要资源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨雁芳		14	213	6.0	14.0
2	张英涛		17	154	6.0	12.0
3	王丽威		1	0	0.0	0.0