缺氧诱导因子-1α小干扰RNA对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子mRNA抑制作用的动态观察

• 作者: 刘艳 孟丽珠 林锦镛 王玉川 陈松 韩梅
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病视网膜病变/病理生理学 视网膜新生血管化 缺氧诱导因子1,α亚基 血管内皮生长因子类 RNA干扰 糖尿病,实验性
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 糖尿病视网膜病变研究
• 页码范围: 245-249
• 分类号: R774|R587.26
• 字数: 5066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2011.03.011

摘要

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小干扰RNA(siRNA)对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的抑制作用.方法 随机对照研究.以pSilencer 2.1-U6neo为质粒载体,构建HIF-1α siRNA重组质粒.雄性Sprague-Dawley大鼠54只,随机分为正常对照组和实验组,分别为15、39只大鼠.实验组大鼠尾静脉注射链尿佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病动物模型,再分为糖尿病模型组、空载体组和基因治疗组,分别为15、12、12只大鼠.脂质体Lipofectamine TM 2000介导,空载体组和基因治疗组分别转染pSilencer空载体质粒和HIF-1αsiRNA重组质粒,糖尿病模型组和正常组对照组不做转染.采用实时逆转录(RT)-聚合酶链式反应(PCR)检测各组大鼠VEGF mRNA的表达.分别于干扰后24、48、72 h,1周时计算VEGF mRNA的抑制效率.采用单因素方差分析和LSD-t检验进行统计学分析.结果 HIF-1α siRNA重组质粒经酶切、测序鉴定,确定为目的 序列.实时RT-PCR检测结果显示,正常对照组仅见弱的VEGF mRNA表达,糖尿病模型组及空载体组表达明显上调,基因治疗组表达下调;各时间点空载体组与糖尿病模型组比较,差异无统计学意义(t=0.669,0.142,0.151,0.025;P=0.514,0.889,0.882,0.980),基因治疗组较糖尿病模型组及空载体组表达下调,差异有统计学意义(t=8.768、13.695、11.285、8.253,t=9.437、13.554、11.436、8.228;P值均=0.000);VEGF mRNA抑制率24、48、72 h和1周时分别为32.76%、43.60%、47.70%、50.86%.结论 HIF-1α siRNA重组质粒能有效抑制糖尿病大鼠视网膜中VEGFmRNA的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈松	天津市眼科医院天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所天津医科大学眼科临床学院	79	412	11.0	15.0
2	林锦镛	天津市眼科医院天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所天津医科大学眼科临床学院	38	127	7.0	7.0
3	刘艳	安徽省阜阳市第二人民医院眼科	20	95	4.0	9.0
4	王玉川	天津市眼科医院天津市眼科学与视觉科学重点实验室天津市眼科研究所天津医科大学眼科临床学院	8	23	3.0	4.0
5	孟丽珠	邢台医专第二附属医院眼科	1	3	1.0	1.0