骨形态发生蛋白4和骨形态发生蛋白4/7基因转染对骨髓基质干细胞成骨活性差异的比较

• 作者: 刘伟 吴滨奇 毕郑钢 袁绍辉 韩晰光
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质干细胞 骨形态发生蛋白 融合基因 腺相关病毒 成骨活性
• 年，卷（期）: 2011,（36）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 6673-6678
• 分类号: R394.2
• 字数: 6083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.36.006

摘要

背景:有文献报道骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)异源二聚体比同源二聚体的活性高,目前国内外尚无BMP-4/7异源二聚体与BMP-4同源二聚体间诱导成骨活性比较的报道.目的:观察不同基因BMP-4、BMP-4/7对骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨活性的差异,探讨融合基因BMP-4/7的生物学活性.方法:经脂质体转染分离培养的兔BMSCs,G418筛选出稳定表达株,利用RT-PCR法证明目的基因在BMSCs中的表达情况;以BMP-4和BMP4/7融合基因修饰的AAV载体,转染兔BMSCs,MTT法检测不同基因转染细胞的增殖能力;以BMP-4单基因和BMP-4/7融合基因修饰的AAV载体转染兔BMSCs 7 d后,测定两组细胞内碱性磷酸酶及骨钙素水平,观察成骨活性的变化.结果与结论:实验成功构建高滴度的分别携带BMP-4单基因、BMP-4/7融合基因的重组腺相关病毒载体AAV-BMP-4、AAV-BMP-4/7;RT-PCR结果证明目的基因能够在BMSCs中得到稳定表达.AAV-BMP-4及AAV-BMP-4/7载体转染效率分别为68.20%、72.18%;转染BMSCs后,细胞增殖能力均明显提高,BMP-4/7融合基因的细胞增殖能力活性高于BMP-4单基因.以BMP-4和BMP-4/7融合基因修饰的AAV转染细胞7 d后,细胞内碱性磷酸酶活性明显上调,骨钙素水平升高,成骨活性均增强;两种基因比较,BMP-4/7融合基因成骨活性强于BMP-4单基因(P < 0.01).提示BMP-4、BMP-4/7修饰的AAV载体转染效率高,对BMSCs均有成骨活性,其中BMP-4/7融合基因成骨活性强于BMP-4单基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟	哈尔滨医科大学附属第一医院骨一科	99	441	11.0	16.0
2	毕郑钢	哈尔滨医科大学附属第一医院骨一科	82	320	9.0	13.0
3	袁绍辉	哈尔滨医科大学附属第一医院骨一科	26	138	8.0	10.0
4	吴滨奇	哈尔滨医科大学附属第一医院骨一科	10	85	6.0	9.0
5	韩晰光	哈尔滨医科大学附属第一医院骨一科	3	8	1.0	2.0