PAK2真核表达载体的构建及在胃癌细胞内的表达与定位

• 作者: 刘芙蓉 李丰 李家滨 李晓东
• 来源期刊: 解剖学研究
• 学科: 医学
• 关键词: PAK2 真核表达 免疫印记 免疫荧光 胃癌
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 202-204
• 分类号: R735.2
• 字数: 2174字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建PAK2真核表达载体及证实在胃癌细胞内的表达与定位.方法 提取HeLa细胞的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增PAK2全长编码基因,克隆至pcDNA3.1A表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,Western blot检测蛋白表达,免疫荧光检测PAK2在胃癌细胞内的定位.结果 hPAK2全长基因序列克隆到了真核表达载体pcDNA3.1A中,酶切鉴定片段为2 000 bp.Western blot检测到重组质粒蛋白表达,分子量约为75 kDa.免疫荧光检测pcDNA3.1A-PAK2在胃癌细胞内的定位以细胞浆为主,细胞核内少许.结论 成功构建hPAK2全长基因真核表达载体,重组质粒主要定位于胃癌细胞浆.