HPV 16 E6E7基因修饰树突状细胞疫苗诱导CTL致CaSki细胞凋亡体外实验研究

• 作者: 兰欢 刘勒 宋方洲 易发平 汪长东 焦庆昉 符少月 艾青 袁成福
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头状瘤病毒 细胞毒性T淋巴细胞 CaSki细胞 树突状细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 115-119
• 分类号: R392.11|R737.33
• 字数: 3918字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.02.005

摘要

目的:采用人乳头状瘤-16(HPV-16) E6E7重组腺病毒(pAd-E6E7)转染树突状细胞(Dendritic cell,DC),观察基因修饰的DC疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)致使CaSki细胞凋亡的效果.方法:将pAd-E6E7转染体外培养的小鼠未成熟树突状细胞制备DC疫苗,激光共聚焦显微镜观察转染的小鼠未成熟树突状细胞绿色荧光蛋白表达,流式细胞术检测转染前后小鼠树突状细胞表面标志物(CD40、CD86、MHCⅡ和CD11C).DC疫苗诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞,与CaSki细胞共培养后,采用DAPI、TUNEL及流式细胞术检测CaSki细胞凋亡情况.结果:pAd-E6E7成功转染体外培养的小鼠未成熟树突状细胞,体外转染效率约为40%～50%,成功制备了HPV 16 E6E7基因修饰树突状细胞疫苗,诱导产生细胞毒性T淋巴细胞,经DAPI、TUNEL及流式细胞术检测证明CaSki出现凋亡.结论:以带有HPV 16 E6E7基因的重组腺病毒载体转染DC制备基因修饰的DC疫苗,诱导CTL致使CaSki细胞出现凋亡.