胡枝子高质量RNA的提取及ALMT基因片段的克隆和表达分析

• 作者: 沈仁芳 赵学强 陈志长
• 来源期刊: 土壤
• 学科: 农学
• 关键词: 胡枝子 改良CTAB法 RT-PCR ALMT基因 铝
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 433-438
• 分类号: S541
• 字数: 4875字
• 语种: 中文

摘要

针对木本植物胡枝子组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,采用改良的CTAB法,成功地从胡枝子组织中提取了总RNA。所提取的胡枝子总RNA OD260/OD280值介于1.9～2.1之间,产率介于100～250μg/g之间。采用该方法提取的胡枝子总RNA,经过RT-PCR成功地克隆到了胡枝子ALMT基因片段,克隆得到的胡枝子ALMT基因片段序列与已知ALMT基因序列之间具有较高同源性,经半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR表达分析,证明该基因在根中表达且受铝诱导。试验结果表明利用改良的CTAB法提取的胡枝子总RNA样品质量较高,能够用于基因的半定量和定量表达分析。