黄瓜花叶病毒NASBA检测技术的建立

• 作者: 冯团诚 刘志昕 吴育鹏 张雨良 王健华 王小明
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 香蕉 黄瓜花叶病毒 核酸序列依赖性扩增 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 139-145
• 分类号: S436.421
• 字数: 3669字
• 语种: 中文

摘要

以香蕉花叶病病样为材料,初步建立了黄瓜花叶病毒核酸序列依赖性扩增(Nucleic acid sequence based amplification,NASBA)的检测技术.通过以香蕉叶片总RNA为模板,在黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)亚组I RNA 2高保守区设计特异引物,进行NASBA反应,经5%琼脂糖凝胶电泳检测,阳性样品中出现了预期大小为310bp的条带,而阴性和空白对照中均未出现.并对11份香蕉样品分别进行NASBA反应,并经过斑点杂交验证与RT-PCR检测比较,两者的检测结果一致,灵敏度相当,检出限量可达100pg.