DNA干扰对低氧诱导的心脏成纤维细胞结缔组织生长因子的表达和胶原合成的影响

• 作者: 刘春涛 孙家扬 黄妮雯
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 心脏成纤维细胞 低氧 结缔组织生长因子 胶原
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 208-212
• 分类号: R3
• 语种: 中文

摘要

目的 研究慢病毒载体pGCL-GFP介导的结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(CTGF-ShRNA)干扰质粒对低氧诱导的大鼠心脏成纤维细胞(CFs)CTGF表达、细胞增殖和胶原合成的影响.方法 构建并筛选CTGF-ShRNA干扰质粒,PCR鉴定阳性克隆,重组质粒转染后随机分为4组,正常(Control)组,低氧(Hypoxia)组,低氧+慢病毒空载体(Hypo+pGCL-GFP)组和低氧+CTGF-ShRNA(Hypo+CTGF-ShRNA)组,实时荧光定量PCR及Western blot分析4组CFs CTGF mRNA及蛋白的相对表达水平,WST-1试剂盒和羟脯氨酸检测试剂盒分别检测4组细胞增殖情况和培养基中的胶原含量.结果 成功构建并筛选CTGF-shRNA.与Control组比较,Hypoxia组、Hypo+pGCL-GFP组、Hypo+CTGF-ShRNA组CTGF mRNA相对表达水平升高(P＜0.05),CTGF蛋白相对表达水平升高(P＜0.05),细胞增殖活跃(P＜0.05),胶原合成升高(P＜0.05).与Hypoxia组和Hypo+pGCL-GFP组比较,Hypo+CTGF-ShRNA组低氧诱导的CFs CTGF mRNA表达被抑制(P＜0.01),CTGF蛋白合成降低(P＜0.01),细胞增殖被抑制(P＜0.01),胶原合成减少(P＜0.01).结论 CTGF-ShRNA抑制低氧诱导的CFs CTGF mRNA表达和蛋白合成,抑制低氧诱导的CFs细胞增殖和胶原合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘春涛	四川大学华西医院临床药理研究所	134	1024	17.0	24.0
5	黄妮雯	四川大学华西医院呼吸内科	2	11	2.0	2.0
6	孙家扬	四川大学华西医院临床药理研究所	1	4	1.0	1.0