脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化

• 作者: 丰秀静 孟春花 成勇 曹少先 王慧利 王锋 钱勇
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 山羊胎儿成纤维细胞 转染效率 脂质体 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 561-565
• 分类号: Q785
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.03.017

摘要

探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法，为筛选出体细胞核移植的供核细胞，制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因，采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导，对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化，荧光显微镜下统计转染后24h的转染效率。结果显示：在24孔培养板中，每孔接种细胞6×104个，24h后进行转染，质粒DNA每孔0.6μg，脂质体与质粒DNA比例为4.5：1.0，脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时，转染效率最高，达到81.2％。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱勇	江苏省农业科学院畜牧研究所	20	126	6.0	10.0
2	王锋	南京农业大学动物科技学院	172	854	17.0	21.0
3	丰秀静	江苏省农业科学院畜牧研究所	5	19	3.0	4.0
7	曹少先	江苏省农业科学院畜牧研究所	32	208	9.0	12.0
8	孟春花	江苏省农业科学院畜牧研究所	17	63	6.0	6.0
9	成勇	扬州大学兽医学院	35	145	8.0	9.0
10	王慧利	江苏省农业科学院畜牧研究所	6	22	3.0	4.0