摘要:
目的 研究RNA干扰caspase-3基因对染铝小鼠神经行为的影响.方法 取健康3月龄雄性昆明种小鼠,按体重随机分为4组:空白对照组(给予生理盐水4 μl)、染铝组(给予0.5%AlCl3·6H2O4μ1)、Al+空载体组(给予0.5%AlCl3·6H2O 3 μl+对照siRNA表达载体1 μl)、Al+RNAi组(给予0.5%AlCl3·6H2O 3μl+目的 siRNA表达载体1 μl),侧脑室注射连续染毒5 d,采用Morris水迷宫试验、旷场试验、跳台试验检测小鼠神经行为改变,电子显微镜观察小鼠海马病理改变,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测caspase-3基因表达量.结果 与空白对照组[分别为(279.00±17.17)s、1.13±0.35]相比,染铝组的潜伏期(LT)[(44.67±10.60)s]明显缩短,错误次数(3.63±0.52)明显增加,Al+空载体组LT[(68.00±14.70)s]明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);Al+RNAi组LT[(239.50±19.36)s]比染铝组明显延长,错误次数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).与空白对照组相比,染铝组逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间明显缩短,Al+空载体组逃避潜伏期明显延长,Al+RNAi组逃避潜伏期较染铝组明显延长,差异均有统计学意义(P<0.05).与空白对照组相比,染铝组和Al+空载体组小鼠中央格停留时间明显延长,直立次数、修饰次数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);Al+RNAi组小鼠中央格停留时间较染铝组明显缩短,跨格次数、直立次数、修饰次数较染铝组明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).空白对照组海马细胞出现轻微改变,染铝组和Al+空载体组海马细胞改变明显,Al+RNAi组海马细胞的病理形态变化减少.空白对照组海马CA3区神经细胞层次较为清楚,基本无变性损伤现象发生;染铝组和Al+空载体组小鼠CA3区细胞数量明显减少,排列不规则,神经元尼氏体着色较空白对照组浅;RNA干扰后,CA3区神经细胞数量明显增加,排列较规则,神经元尼氏体着色逐渐加深.染铝组和Al+空载体组的caspase表达量(分别为2.24±0.57、2.28±0.33)较空白对照组(1.00±0.00)明显增加,Al+RNAi组的的caspase-3表达量(0.44±0.08)较空白对照组和染铝组明显降低,差异均有统计学意议(P<0.05).结论 铝可以引起小鼠学习和记忆能力障碍,活跃程度及探索能力下降,而RNAi技术能够在一定程度上减轻该毒性作用.