香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定

• 作者: 史雨红 张亮 李明云 陆新江 陈炯
• 来源期刊: 水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: cDNA文库 香鱼 肝胰腺 弹性蛋白酶 序列分析
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 11-16
• 分类号: Q785
• 字数: 4300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1111.2011.01.003

摘要

以香鱼正常肝胰腺为材料,构建cDNA文库.初始文库库容大于1.3×107 cfu/ml,扩增文库的滴度大于1.1×106cfu/ml,平均插入片段约为1.0 kb.从文库中随机挑选297个cDNA克隆测序,得到232个功能已知EST序列,功能包括代谢、蛋白质合成、细胞与机体防御、信号转导以及细胞结构与运动等5个方面.随机测序获得香鱼弹性蛋白酶(Elastase,ELA)编码序列,cDNA序列全长957个核苷酸,3'-末端具有polyA尾,编码一个由268个氨基酸组成28.7 ku大小蛋白.序列分析表明,香鱼ELA的N端15个氨基酸为信号肽,成熟肽具有丝氨酸蛋白酶家族的典型结构特征.香鱼ELA与斜带石斑鱼、大西洋鳕和金头鲷的ELA氨基酸序列同源性最高,达76%～77%.系统进化树分析表明,香鱼ELA与其他鱼类ELA紧密成簇.RT-PCR检测显示,香鱼ELA基因mRNA在香鱼肝胰腺、脾、肠组织中均大量表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	100	594	13.0	18.0
2	史雨红	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	47	397	10.0	18.0
3	陆新江	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	20	98	6.0	9.0
4	李明云	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	156	1723	22.0	34.0
5	张亮	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	8	149	5.0	8.0