磷酸钙法转染瘤细胞效率的优化

• 作者: 侯颖春 刘月月 张楠楠 强荣兵 魏丽丽
• 来源期刊: 陕西师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 磷酸钙转染法 细胞转染 转染效率 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 73-77
• 分类号: R730
• 字数: 3752字
• 语种: 中文

摘要

为了探索磷酸钙法转染瘤细胞的最佳转染条件,以磷酸钙法将ANXA2特异性重组干扰质粒pU6H1-GFP-siANXA2导入人肝癌细胞SMMC-7721并优化了以下转染参数:转染前细胞汇合率、质粒剂量、质粒复合物形成时间、孵育时间、血清、抗生素有无及细胞传代次数等.以荧光显微镜观察GFP表达、半定量RT-PCR和western blotting评估转染效率.结果显示,转染前细胞50%～60%汇合率、8μg质粒用量(直径30 mm培养皿)、20～30 min沉淀形成时间及6 h孵育时间转染效率较高;细胞传代次数及抗生素有无对转染效率影响不显著,但血清在实验条件下是必不可少的.转染48 h后,GFP表达进入高峰期、ANXA2 mRNA和蛋白水平下调(P＜0.05).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏丽丽	肿瘤分子细胞生物学实验室陕西师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
2	强荣兵	肿瘤分子细胞生物学实验室陕西师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
3	张楠楠	肿瘤分子细胞生物学实验室陕西师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
4	刘月月	肿瘤分子细胞生物学实验室陕西师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
5	侯颖春	肿瘤分子细胞生物学实验室陕西师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0