小鼠角膜组织石蜡切片制作方法的探讨

• 作者: 夏丽坤 张胜男 胡媛
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠角膜 组织固定 石蜡切片
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 208-210
• 页数: 3页
• 分类号: Q959.836|R772.2
• 字数: 3137字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨一种效果较好的小鼠角膜石蜡切片制作方法. 方法 取30只BALB/C小鼠取出眼球后,A组20只眼球,用固定液l(体积分数10%中性甲醛10 mL、体积分数95%乙醇85 mL、冰醋酸5 mL混合)固定;B组20只眼球,用固定液2(多聚甲醛4 g,加入0.1 mol·L-1磷酸缓冲液80 mL,加热至60℃左右,持续搅拌,使粉末完全溶解,加少许1mol·L-1 NaOH澄清.待冷却后,加冰醋酸5 mL、丙酮10 mL,用0.1 mol·L-1磷酸缓冲液补足至100 mL)固定;C组20只眼球,用固定液3(无水乙醇60 mL、体积分数10%中性甲醛10 mL、冰醋酸10 mL、氯仿20 mL混匀)固定.所有眼球标本固定2 h后,显微镜下去除巩膜、虹膜、晶状体,完整保留角膜.固定24 h后,分别做HE染色和免疫组织化学染色,显微镜下观察其差异. 结果 大体观察:A组部分角膜皱缩变形;B组、C组角膜外形均无明显变化,无皱缩和凹陷变形,能保持原有的形态.HE染色示A组标本染色鲜明,角膜各层结构清楚,但是角膜基质层出现明显脱水现象;B组标本未见明显脱水现象,但角膜结构过度压缩,出现明显的脱片现象;C组标本可观察到角膜各层组织结构完整,无明显结构改变,未见脱片及基质层脱水现象,角膜各层组织结构清晰无裂隙.免疫组织化学染色3组均显示HVEM阳性,但C组标本染色效果优于A组、B组,且脱片程度低,固定液3适用于角膜组织的固定. 结论 固定液3固定角膜组织,效果优于其他两种固定液.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏丽坤	中国医科大学附属盛京医院眼科	54	233	8.0	12.0
2	张胜男	中国医科大学附属盛京医院眼科	8	35	4.0	5.0
3	胡媛	中国医科大学附属盛京医院眼科	4	20	3.0	4.0