发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒结构和非结构蛋白表达研究

• 作者: 仇佩虹 卢静 张全福 张福顺 张黎 李川 李德新 梁米芳 王涛 王芹 芜为
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒 病毒颗粒沉降密度 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 515-520
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9|R558+2
• 语种: 中文

摘要

发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)是我国2010年新发现的新布尼亚病毒,可导致人类严重发热伴血小板减少综合征.SFTS新布尼亚病毒全基因组已解析[1],但病毒分子生物学结构蛋白特征及功能尚需更多研究.本文通过蔗糖密度梯度离心确定发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(HB29株)病毒颗粒的沉降密度及超离纯化条件,得出该病毒颗粒在蔗糖中的沉降密度为1.135g/mL.利用PCR方法扩增SFTSV病毒株HB29株病毒RNA聚合酶(RdRp)、糖蛋白前体蛋白(M)、包膜糖蛋白(Gn)、包膜糖蛋白(Gc)、核蛋白(NP)及非结构蛋白(NSs)的编码区基因片段,分别克隆入真核表达载体pcDNA5/FRT或VR1012,在293T细胞上获得上述基因表达.通过SDS-PAGE分析纯化病毒颗粒和重组蛋白,并通过免疫印迹(Western blotting)和间接免疫荧光(IFA)确定蛋白活性和分子量.本研究结果将有利于对新布尼亚病毒分子生物学特征的认识,为后期研究提供基础.