两种不同染色法在流式细胞术中检测细胞周期的探讨

• 作者: 余细勇 单志新 杨敏 林秋雄 钟诗龙 麦丽萍
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PI染色法 DAPI染色法 细胞周期 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1363-1366
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的 比较碘化丙啶(PI)和4,6-联脒-2苯基吲哚(DAPI)两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响.方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种方法的测定结果,同时进行细胞计数,观察细胞浓度变化.结果 PI和DAPI法染色后0h上机测定,结果分别为:CV值(7.72±0.19)、(5.92±0.09),G0/G1期含量(69.63±1.16)％、(69.87±1.28)％,S期含量(24.53±0.47)％、(24.43±0.86)％,G2/M期含量(5.85±1.04)％、(5.72-0.65)％,两种方法检测细胞周期的结果基本一致(P＞0.05)；染色后24h重新测定,结果分别为:CV值(8.82±0.05)、(6.09±0.30),G0/G1期含量(58.50±0.90)％、(70.47±0.81)％,S期含量(31.73±0.75)％、(23.67±0.45)％,G2/M期含量(9.51±0.47)％、(5.86±0.46)％,两种方法检测细胞周期的结果差异有统计学意义(P＜0.05).DAPI法染色后0和24h测定结果基本一致(P＞0.05),而PI法检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).细胞计数结果显示,放置24hPI法细胞损耗为63.14％,DAPI法细胞损耗为12.50％,两种方法结果差异有统计学意义(P＜0.05).染色24h后PI法细胞开始崩解,镜下见较多的细胞碎片,而DAPI法细胞形态良好.结论 应用流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色法优于PI染色法.