荧光抗体标记法在小鼠脉络膜新生血管中的应用

• 作者: 庹旌生 陈莉 陈辉 顾丽萍 高小伟
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜新生血管 激光光凝术 荧光抗体
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 619-624
• 分类号: R773.4
• 字数: 5338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.07.010

摘要

背景 脉络膜新生血管(CNV)是导致多种眼底疾病视力损害的主要原因,准确建立CNV模型对于其实验和临床研究具有重要的意义,但目前尚无一种可重复且可靠的评估CNV模型及其有效治疗的方法.目的 探讨荧光抗体标记法在定性和定量评价氪激光诱导的小鼠CNV中的应用价值.方法 选取15只雄性SPF级 C57BL/6J小鼠,用氪激光(波长为647.1nm)视网膜光凝的方式建立CNV模型.分别于光凝后5min,4、7、14 及28d随机选取3只模型小鼠行眼底照相和荧光素眼底血管造影(FFA)检查.摘除眼球行脉络膜铺片,用荧光抗体(DAPI、isolectin-B4及phalloidin)分别标记光凝区域的细胞核、内皮细胞和肌动蛋白.用Image pro plus 6.0软件测量CNV面积.结果 FFA和脉络膜铺片检查结果显示激光光凝后5min及4d无CNV形成,光凝后7d开始出现CNV.光凝后7、14、28d有荧光素渗漏的光凝斑的百分率分别为76.47%(26/34)、81.81%(18/22)和50.00%(5/10).脉络膜铺片后荧光显微镜检测结果显示,在正常的未光凝区域,视网膜色素上皮(RPE)细胞呈均匀一致的六边形排列;光凝后5min,在光凝部位可检测到一个环形荧光素缺损区,表明脉络膜-Bruch膜-RPE复合体已被破坏;光凝后4d出现一些细胞碎片以及核碎片,Bruch膜破损处可见自发荧光环.光凝后7d时,激光损伤区出现界限清楚的CNV网,并持续到28d.7、14及28d时根据脉络膜铺片所测得的CNV面积分别为(7.99±0.42)×103、(16.89±8.77)×103、(14.37±4.02)×103μm2,差异有统计学意义(F=17.340,P=0.000).光凝后14d和28d脉络膜铺片上CNV面积相差不大,但与7d时相比面积均明显增加(q=16.46、q=15.54,P＜0.01).结论 荧光抗体标记法不仅能很好地显示氪激光诱导的小鼠实验性CNV及其形态,而且能测定CNV的面积,为抗新生血管药物应用的疗效研究提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈莉	南通大学病理教研室	161	548	10.0	16.0
2	陈辉	南通大学附属医院眼科	72	226	8.0	9.0
3	庹旌生	南通大学附属医院眼科	3	7	2.0	2.0
4	顾丽萍		2	5	1.0	2.0
5	高小伟	南通大学附属医院眼科	6	18	2.0	4.0