通过替代失活的方法分析核酸片段在肺炎链球菌毒力中的作用

• 作者: 张彦青 张群 张雪梅 王虹 胥文春 钟文 黄健
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 单一突变 生长 毒力
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 转化医学研究
• 页码范围: 327-333
• 分类号: R34
• 字数: 3837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2011.04.010

摘要

目的 鉴定基因spd-ABC、spd-1672、spd-1673和长间隔序列spd-J在肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)毒力中的作用.方法 采用长臂同源聚合酶链反应(LFH-PCR)的方法分别构建这4个序列的红霉素抗性基因(erm)替代缺失突变体,通过PCR和测序鉴定是否构建成功;通过绘制生长曲线观察基因对细菌生长繁殖的影响,通过小鼠毒力实验观察基因对细菌致病性的影响.结果 所构建缺陷菌目的 基因由erm基因完全替代;spd-ABC、spd-1673和长间隔序列spd-J 3个片段缺陷菌的生长趋势与野生菌没有明显差异,生长大约5 h A值均可达到峰值,而spd-1672缺陷菌出现明显的延迟现象,生长8 h后其A值才达到最高值;野生菌与缺失spd-ABC、spd-1673和长间隔序列spd-J的缺陷菌感染小鼠各组半数死亡时间分别为19、22、24和24 h,差异无统计学意义,而spd-1672缺陷菌感染小鼠的半数死亡时间在75 h左右,显著长于野生菌感染小鼠组(P＜0.05).结论 在构建的4个单个基因缺失突变体中,spd-1672缺陷后S.pn生长明显延迟,毒力显著下降,提示spd-1672是S.pn的一个新的毒力因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟文	重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0
2	张群	重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室	7	28	3.0	5.0
3	胥文春	重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室	33	103	6.0	9.0
4	王虹	重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室	28	209	7.0	14.0
5	黄健		21	35	4.0	5.0
6	张彦青	重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0