EB病毒早期基因BHRF1转基因模型鼠的建立

• 作者: 李欣 王云 王笑峰 罗兵 贾玉平
• 来源期刊: 青岛大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 疱疹病毒4型,人 早期基因BHRF1 小鼠,转基因
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-17,22
• 分类号: R332
• 字数: 3822字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建稳定表达EB病毒早期基因BHRF1蛋白的重组载体,通过显微注射法建立BHRF1转基因鼠模型.方法 自EBV阳性细胞系B95-8提取总RNA,应用RT-PCR扩增BHRFI基因,然后与pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3,1-BHRF1重组载体.重组载体用Nru Ⅰ和Dra Ⅲ双酶切,电泳后纯化回收长约2 000 bp的目的 片段溶于显微注射缓冲液.从超排小鼠取健康受精卵.通过显微注射技术,将纯化的CMV+BHRF1+potyA DNA片段注射入小鼠受精卵,短暂培养后选择健康受精卵移人假孕母鼠输卵管内.采用PCR检测子鼠鼠尾组织DNA,鉴定筛选BHRF1阳性首建鼠.结果 经PCR、限制性内切酶鉴定及测序证实pcDNA3.1-BHRF1重组载体构建成功,Dra Ⅲ和Nru Ⅰ双酶切获得长约2 000 bp的CMV+BHRF1+polyA DNA片段.自18只见栓超排小鼠获取健康受精卵480枚.分别注入纯化的目的 片段,经短暂培养后390枚受精卵仍健康,移入14只假孕母鼠输卵管内,11只受孕,产下74只子鼠.PCR检测子鼠鼠尾DNA获得16只阳性首建鼠.阳性率为21.6%(16/74).结论 本实验首次建立了BHRF1转基因鼠模型.为深入研究BHRFl的生物学特性及其在EBV相关肿瘤发生发展中的作用提供了理想的动物模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗兵	青岛大学医学院微生物学教研室	216	931	14.0	19.0
2	王笑峰	青岛大学医学院微生物学教研室	63	179	7.0	11.0
3	王云	青岛大学医学院微生物学教研室	74	250	9.0	13.0
4	李欣	青岛大学医学院微生物学教研室	13	31	4.0	5.0
8	贾玉平	青岛大学医学院微生物学教研室	1	1	1.0	1.0