枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究

• 作者: 李瑞芳 熊前程 王彬 薛雯雯 黄亮
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 感受态细胞 质粒转化方法
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 227-230
• 分类号: Q782
• 字数: 3480字
• 语种: 中文

摘要

为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进.用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DBl342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响.结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DBl342的转化率为750 CFU/μg/DNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/xg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg/DNA.根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄亮	河南工业大学生物工程学院	20	123	5.0	10.0
2	李瑞芳	河南工业大学生物工程学院	47	337	8.0	16.0
3	薛雯雯	河南工业大学生物工程学院	7	88	5.0	7.0
4	熊前程	河南工业大学生物工程学院	4	69	3.0	4.0
5	王彬	河南工业大学生物工程学院	4	65	3.0	4.0