实时定量PCR检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及临床应用

• 作者: 崔希增 康军仁 徐云飞 房嘉宾 郭广亮 马恩陵
• 来源期刊: 中华临床营养杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时定量PCR 烟曲霉 全血 外科感染
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 154-158
• 分类号: R631|Q503
• 字数: 5200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-635X.2011.03.005

摘要

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及进行初步临床应用.方法 基于烟曲霉多拷贝基因ITS1-5.8S基因设计引物和TaqMan探针,用QIAamp(R)DNA Blood Mini Kit提取烟曲霉基因组DNA,建立20μl RQ-PCR反应体系,对含有不同载量烟曲霉基因组的模拟人全血标本和66份外科发热患者全血标本进行烟曲霉基因组的定量检测.结果 检测限为10-1基因组/μl上机待测液(即约78 CFU/ml全血);检测特异度和灵敏度分别为94.25%和99.04%,阳性预告值和阴件预告值分别为97.63%和97.62%;测定结果的平均相对误差为(3.67±13.19)%;批内及批间平均重复性变异系数分别为(12.38±1.53)%和(16.27±2.72)%;人血标本中烟曲霉基因组平均回收率为(107.81±25.92)%,回收率平均变异系数为(26.24±5.62)%.66份外科发热患者血标本中未检测出烟曲霉基因组.结论 RQ-PCR可以快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中烟曲霉基因组的载量,且有着较好的准确度与精密度.本研究外科发热患者血中未检测到烟曲霉基因组.