神经元素3与成对盒基因4促进胰腺十二指肠同源框蛋白1诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化

• 作者: 何敏 刘思景 唐小龙 张成 王云秀 肖瑞 谢婷
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 同源盒结构域蛋白质类 间质干细胞 胰腺 成对盒基因4 神经元素3
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 421-426
• 分类号: R329.26
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2011.03.021

摘要

目的:探索神经元素3(neurogenin 3,NGN3)与成对盒基因4(paired box gene 4,PAX4)对胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal homeobox factor 1,PDX1)驱动间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向胰腺β细胞分化过程中的作用.方法:构建PDX1基因及NGN3与PAX4双基因表达腺病毒,重组腺病毒Adxsi-CMV-PDX1感染诱导MSCs1周后,再行重组腺病毒Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4感染诱导MSCs;分别检测PDX1、PAX4、NGN3、NK转录因子相关的2.2(NK transcription factor related,gene family 2,locus2,NKX2.2)、v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B(MafB)、胰岛素(Insulin)、胰高血糖素(Gucagon)多种胰腺分泌细胞相关分子表达情况.结果:成功构建腺病毒Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4;MSCs经Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4分步诱导后,免疫细胞化学与间接荧光检测显示PDX1、NGN3与PAX4因子在细胞核内稳定表达;重组腺病毒稳定转染5 d后,细胞开始变圆并集聚成团,用双硫腙(dithizone,DTZ)染色细胞质呈亮红色;细胞经诱导1周后,用RT-PCR检测到神经源分化因子1(neurogenic differentiation 1,NruroD1)与NKX2.2表达,2周后可检测胰岛素/胰岛素原分子;间接荧光检测显示诱导后的细胞先后开始表达NKX2.2、MafB等转录因子与胰岛素/胰岛素原、胰高血糖等胰岛分泌细胞相关分子,但未能检测到v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A(MafA)与C肽分子表达.结论:NGN3与PAX4对PDX1诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化具有促进作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖瑞	广州医学院临床技能中心	11	83	5.0	9.0
2	谢婷	广东省中医院检验科	23	51	4.0	5.0
3	王云秀	广东省中医院检验科	16	87	6.0	8.0
4	唐小龙	广东省中医院检验科	12	71	5.0	8.0
5	张成	广东省中医院检验科	9	60	5.0	7.0
6	刘思景	广东省中医院检验科	14	55	5.0	7.0
7	何敏	广东省中医院检验科	26	125	6.0	9.0