不同代次兔髓核细胞冻存后的生物学特性比较

• 作者: 于占革 张东 徐学振 李念龙 杨威 魏伟
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 髓核细胞 冻存 不同代次 细胞活力 细胞培养 兔
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 680-684
• 分类号: Q813|R681.5
• 字数: 4326字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2011.08.12

摘要

目的:比较不同代次兔髓核细胞冻存后的生物学特性,找出适合作为种子细胞冻存的兔髓核细胞代次.方法:取3～4月龄新西兰大白兔10只,麻醉后在严格无菌条件下分离胸腰椎间盘(T1/2～L7/S1)髓核细胞,体外传代培养,分别取一、二、三、四、五代细胞冻存2～3个月后复苏,取一代未冻存细胞作为对照组(A组,n=10);一、二、三、四、五代冻存后复苏的细胞作为实验组(分别为B、C、D、E、F组,各组n=10),在相同条件下培养2周,培养第2天时采用台盼蓝染色测定细胞成活率;培养第2d、5d、10d、14d时采用MTT法检测细胞生长活性,采用间苯三酚分光光度法测定蛋白多糖(PG)含量;培养第14d时采用阿利新兰染色法测定糖胺聚糖(GAG)合成总量,用RT-PCR法检测各组细胞Ⅱ型胶原基因的表达情况.检测细胞浓度均为1x10(5)个/ml.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果:培养第2d时B、C组细胞成活率接近A组(P>0.05);D、E、F三组细胞成活率明显低于A、B、C组(P<0.05).不同时间点各组细胞均有不同程度的增殖,A、B、C、D四组生长趋势较接近.A、B、C三组相同时间点生长活性比较差异无统计学意义(P>0.05),D组与同一时间点A组比较有显著性差异(P<0.05),E组第10d和第14d以及F组各时间点间比较差异无显著性(P>0.05);A、B、C三组各时间点的PG含量及GAG含量高于相应时间点D、E、F组(P<0.05);A、B、C三组的Ⅱ型胶原基因表达量高于D、E组(P<0.05),明显高于F组(P<0.01).结论:不同代次兔髓核细胞冻存后生物学特性不同,第一、二代细胞冻存后能较好保持髓核细胞特性,可作为种子细胞进行低温保存.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨威	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	67	281	10.0	14.0
2	于占革	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	28	147	6.0	11.0
3	徐学振	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	2	11	2.0	2.0
4	魏伟	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	3	13	2.0	3.0
5	李念龙	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	3	30	3.0	3.0
6	张东	哈尔滨医科大学附属第一医院骨科	1	3	1.0	1.0