家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析

• 作者: 凌琳 周敬波 尤征英 徐家萍 杨莹 王成林
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 果蝇 抗菌肽 Cecropin B 原核表达 抗菌活性 基因结构
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 246-253
• 分类号: S881.2|Q969.462.2|Q78
• 字数: 6381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.02.010

摘要

动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料.为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophila melanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达.通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL.经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 ms/mL.以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2.用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐家萍	安徽农业大学生命科学学院	16	103	6.0	10.0
2	尤征英	安徽农业大学生命科学学院	4	31	2.0	4.0
3	杨莹	安徽农业大学生命科学学院	4	30	2.0	4.0
4	凌琳	安徽农业大学生命科学学院	5	17	2.0	4.0
5	王成林	安徽农业大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
6	周敬波	安徽农业大学生命科学学院	1	5	1.0	1.0